有機(jī)碳是土壤中的重要組分，有機(jī)碳組分是影響土壤有機(jī)碳活性及生態(tài)效應(yīng)的主要內(nèi)因。為更好的揭示有機(jī)碳組分對(duì)生態(tài)環(huán)境演變的響應(yīng)規(guī)律，系統(tǒng)的分級(jí)土壤有機(jī)碳是研究的重點(diǎn)。本研究為獲得土壤有機(jī)碳多級(jí)浸提方法，在前人研究的基礎(chǔ)上選擇四種浸提劑，確定浸提時(shí)間，并對(duì)樣品土壤進(jìn)行測(cè)定。
土壤樣品
試驗(yàn)用樣品采分別采集自林地、草地和農(nóng)田地11個(gè)土壤，采集0~20cm表層土壤，土壤樣品自然風(fēng)干后，研磨，過(guò)100目篩備用。土壤類(lèi)型為栗鈣土，砂壤土和壤土，土壤理化指標(biāo)如圖所示。
土壤有機(jī)碳連續(xù)提取不同時(shí)間下有機(jī)碳提取量的變化
實(shí)驗(yàn)儀器
TOC測(cè)定儀、恒溫振蕩器、高速離心機(jī)、水浴鍋、pH計(jì)。
所需溶液
試 驗(yàn) 用 浸 提 劑 分 別為 蒸 餾 水、1mol·L -1的HCl、0.2mol·L-1的NaOH，輔助試劑分別為0.1mol·L-1的HCl、0.2mol·L-1的NaOH。
實(shí)驗(yàn)步驟
根據(jù)研究結(jié)果可見(jiàn)，土壤有機(jī)碳可以利用不同浸提液連續(xù)提取獲得具有不同生態(tài)功能及活性的溶解性有機(jī)碳組分。
（1）水溶性有機(jī)碳：
干燥土壤樣品過(guò)100目篩，取1~2g土壤樣品置于離心管中，按固液質(zhì)量比1：2，加入去離子水，在25℃下恒溫振蕩12h（200rpm），然后離心（5000rpm，15min），上清液過(guò)0.45μm 無(wú)菌微孔濾膜過(guò)濾，利用TOC以測(cè)定浸提液中碳含量，為水溶性有機(jī)碳，主要為一些低分子量糖類(lèi)、氨基酸等，來(lái)源于植物凋落物滲透液、土壤微小動(dòng)物和根系分泌物等，是土壤微生物分解的活性底物。
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（2）熱水解有機(jī)碳：
殘?jiān)尤肴ルx子水，放入水浴鍋中100℃下，水浴2h，期間不斷振蕩（也可放置在水浴振蕩器中），離心，過(guò)濾，利用TOC儀測(cè)定浸提液中碳含量，主要是土壤和凋落物中活性有機(jī)碳，即土壤團(tuán)粒體表面吸附的有機(jī)碳，及受到干擾后易于降解的有機(jī)碳組分。
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（3）酸水解有機(jī)碳：
殘?jiān)尤?mol·L-1的鹽酸，振蕩2h，離心，過(guò)濾，調(diào)節(jié)浸提液pH值至7，利用TOC儀測(cè)定浸提液中碳含量，主要是土壤中蛋白質(zhì)、核酸和多糖等大分子有機(jī)物[19,24]，即腐殖質(zhì)中富里酸等成分。
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（4）堿水解有機(jī)碳：
殘?jiān)尤?.2mol·L-1的NaOH，振蕩6h，離心，過(guò)濾，調(diào)節(jié)浸提液pH值至7，利用TOC儀測(cè)定浸提液中碳含量，主要是土壤中穩(wěn)定態(tài)腐殖質(zhì)，即胡敏酸等成分[14,25]。土壤總有機(jī)碳含量減去四步提取的有機(jī)碳含量可獲得土壤中難溶性有機(jī)碳含量，即土壤中的惰性有機(jī)碳，主要是木質(zhì)素等難溶的、活性較低的有機(jī)碳組分。在浸提的過(guò)程中可以同時(shí)測(cè)定浸提液中氮含量，進(jìn)而獲得土壤中不同溶解態(tài)氮含量。
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浸提時(shí)間
浸提時(shí)間是影響土壤有機(jī)碳組分浸提量的關(guān)鍵參數(shù)，水溶解性有機(jī)碳浸提時(shí)間分別設(shè)定為6、8、12、16、20h；熱水溶性有機(jī)碳水浴時(shí)間分別設(shè)定為0.5、1、2、4、6h；酸水解有機(jī)碳浸提時(shí)間分別設(shè)定為0.5、1、2、4、6h；堿水解有機(jī)碳浸提時(shí)間分別設(shè)定為2、4、6、8、12h。
數(shù)據(jù)處理
試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與作圖采用Excel軟件，數(shù)據(jù)分析采用SPSS軟件進(jìn)行。
該提取方法與傳統(tǒng)分級(jí)方法相比較，充分利用不同提取劑對(duì)土壤有機(jī)碳分離能力，從而實(shí)現(xiàn)了依據(jù)復(fù)雜有機(jī)碳組分在不同提取液中的溶解性，將其分離測(cè)定，能夠更加準(zhǔn)確的反映土壤有機(jī)碳對(duì)生態(tài)系統(tǒng)的響應(yīng)機(jī)制。
※ 本文引用自：臧榕,趙海超,黃智鴻,等.土壤溶解性有機(jī)碳組分連續(xù)分級(jí)測(cè)定方法[J].科技創(chuàng)新導(dǎo)報(bào), 2018, 15(29):5.DOI:CNKI:SUN:ZXDB.0.2018-29-038.
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